एंगेलहार्डिया रॉक्सबर्गियाना लीफ एक्सट्रैक्ट डीएचक्यूउत्पादक
एंगेलहार्डिया रॉक्सबर्गियाना लीफ एक्सट्रैक्ट डायहाइड्रोक्वेरसेटिनएक डायहाइड्रोफ्लेवोनोल यौगिक है जो कई पौधों में पाया जाता है। बाज़ार में सिंथेटिक डाइहाइड्रोक्वेरसेटिन के अलावा, मुख्य प्राकृतिक स्रोत लार्च है। हमारी कंपनी ने एस्ट्रैगलस मेम्ब्रेनियस की पत्तियों पर शोध के माध्यम से पाया है कि एस्ट्रैगलस मेम्ब्रेनसियस की प्राकृतिक पत्तियों में भी डायहाइड्रोक्वेरसेटिन होता है। चूंकि लार्च के संसाधन लगातार दुर्लभ होते जा रहे हैं, हमारी कंपनी की खोज डायहाइड्रोक्वेरसेटिन की उत्पादन लागत को काफी कम कर सकती है और बाजार में सबसे अधिक लागत प्रभावी डायहाइड्रोक्वेरसेटिन उत्पाद प्रदान कर सकती है।
चीन में डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के सबसे बड़े उत्पादक के रूप में, KINTAI के पास डायहाइड्रोक्वेरसेटिन तैयार करने के लिए दो मुख्य प्रक्रिया मार्ग हैं: जैवसंश्लेषण और निष्कर्षण। वर्तमान में हम जो डायहाइड्रोक्वेरसेटिन उत्पादित करते हैं वह मुख्य रूप से लार्च से निकाला जाता है, और कुछ वुल्फबेरी पत्तियों से निकाला जाता है। जैवसंश्लेषण पायलट उत्पादन परीक्षण में प्रवेश करने वाला है, और एक बार पूरा होने पर, यह आपके लिए उच्च गुणवत्ता वाले और कम लागत वाले डायहाइड्रोक्वेरसेटिन उत्पाद लाएगा। निम्नलिखित में, हम मुख्य रूप से वुल्फबेरी पत्तियों और जैवसंश्लेषण की संश्लेषण विधि का उपयोग करके हमारी कंपनी की वर्तमान निष्कर्षण प्रक्रिया का परिचय देते हैं। यदि आप अधिक विवरण में रुचि रखते हैं, तो कृपया अधिक पेशेवर उत्तरों के लिए हमसे संपर्क करें।
पीली वुल्फबेरी पत्तियों से डायहाइड्रोक्वेरसेटिन की KINTAI निष्कर्षण प्रक्रिया
हमारा उत्पादन शुद्धता और उच्च गुणवत्ता सुनिश्चित करने के लिए एक बहु-चरणीय प्रक्रिया अपनाता हैएंगेलहार्डिया रॉक्सबर्गियाना लीफ एक्सट्रैक्ट डीएचक्यू.
कच्चे माल का प्रसंस्करण: ताजी पीली वुल्फबेरी पत्तियों का चयन करें, अशुद्धियों को हटा दें और यह सुनिश्चित करने के लिए उन्हें काट लें कि बाद की निष्कर्षण प्रक्रिया में सक्रिय तत्व पूरी तरह से निकल जाएं।
निष्कर्षण और एकाग्रता:दो भाटा निष्कर्षणों के लिए 80% इथेनॉल समाधान का उपयोग करें। पीली वुल्फबेरी पत्तियों में सक्रिय तत्वों के कुशल निष्कर्षण को सुनिश्चित करने के लिए पहली बार इथेनॉल की 6 गुना मात्रा और दूसरी बार 5 गुना इथेनॉल जोड़ें। उत्पाद सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए इथेनॉल को हटाने के लिए अर्क को कम दबाव में केंद्रित किया जाता है।
कॉलम क्रोमैटोग्राफी शुद्धि:आगे पृथक्करण और शुद्धिकरण के लिए मैक्रोपोरस सोखना रेजिन जैसे डी101, एबी-8, और एनकेए-II का उपयोग करें। निक्षालन प्रक्रिया ठीक है, और निक्षालन के लिए 70% इथेनॉल समाधान का उपयोग किया जाता है। अर्क का रंग पारदर्शी होता है।
क्रिस्टलीकरण:सटीक विलायक सांद्रता और शीतलन प्रक्रिया के माध्यम से, हल्के पीले डायहाइड्रोक्वेरसेटिन सुई क्रिस्टल उत्पन्न होते हैं।
हाइड्रोलिसिस:अर्क को 95.7%-96.5% की सामग्री के साथ उच्च शुद्धता वाले डायहाइड्रोक्वेरसेटिन प्राप्त करने के लिए हाइड्रोलाइज्ड और पुन: क्रिस्टलीकृत किया जाता है।
एचपीएलसी क्रोमैटोग्राम विश्लेषण
उत्पादन प्रक्रिया के दौरान, उत्पाद की उच्च शुद्धता और दक्षता सुनिश्चित करने के लिए सभी डायहाइड्रोक्वेरसेटिन का उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी द्वारा परीक्षण किया जाता है। जैसा कि चित्र में दिखाया गया है, एचपीएलसी क्रोमैटोग्राम का सटीक विश्लेषण डायहाइड्रोक्वेरसेटिन सामग्री को दर्शाता है।
सीओएऔर डीएचक्यू की तरल क्रोमैटोग्राफी विश्लेषण रिपोर्ट
डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के संश्लेषण पर किंताई का नवीनतम शोध
हमारी शोध टीम ने हाल ही में डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के माइक्रोबियल संश्लेषण के अध्ययन में एक महत्वपूर्ण सफलता हासिल की है
डायहाइड्रोक्वेरसेटिन एक महत्वपूर्ण फ्लेवोनोइड यौगिक है जिसका एंटीऑक्सिडेंट, सूजन-रोधी, ट्यूमर-रोधी और अन्य शारीरिक गतिविधियों के कारण भोजन, दवा और कृषि में व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। हालाँकि, पारंपरिक पौधे निष्कर्षण के तरीके मौसम, भौगोलिक परिस्थितियों और कच्चे माल की आपूर्ति से सीमित हैं, जिसके परिणामस्वरूप उच्च उत्पादन लागत और अस्थिर उत्पादन होता है। इसलिए, डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के विषम संश्लेषण के लिए सूक्ष्मजीवों का उपयोग एक आकर्षक विकल्प बन जाता है।
माइक्रोबियल संश्लेषण न केवल पौधों के निष्कर्षण की इन बाधाओं से बच सकता है, बल्कि छोटे उत्पादन चक्र, कम पर्यावरणीय आवश्यकताओं और आसान गुणवत्ता नियंत्रण के फायदे भी हैं। हालाँकि, चयापचय विनियमन जैसे कारकों की सीमाओं के कारण, सूक्ष्मजीवों में डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के संश्लेषण को कुशलतापूर्वक कैसे प्राप्त किया जाए, यह एक बड़ी चुनौती बनी हुई है। प्रमुख एंजाइमों की स्क्रीनिंग, प्रमोटर इंजीनियरिंग, मल्टी-कॉपी इंटीग्रेशन और मेटाबॉलिक रिप्रोग्रामिंग के माध्यम से, हमने डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन में काफी सुधार किया है और इसके औद्योगिक उत्पादन के लिए एक प्रभावी तरीका प्रदान किया है।
प्रमुख एंजाइमों F3'H और F3H की स्क्रीनिंग और अनुकूलन
डायहाइड्रोक्वेरसेटिन की संश्लेषण प्रक्रिया दो प्रमुख एंजाइमों, F3'H और F3H के उत्प्रेरण पर निर्भर करती है। F3'H (2S)-एरियोडिक्टिओल उत्पन्न करने के लिए फ्लेवोनोइड कंकाल की C-3' स्थिति पर (2S)-नारिंगेनिन के हाइड्रॉक्सिलेशन को उत्प्रेरित करता है; F3H (2S)-नारिंगेनिन को डायहाइड्रोकेम्फ़ेरोल में परिवर्तित करता है। डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन में सुधार के लिए, हमने विभिन्न पौधों से तीन F3'H और पांच F3H की जांच की। प्रयोगों के बाद, यह पाया गया कि एसएमएफ 3'एच और सीएसएफ 3 एच में सबसे अच्छा उत्प्रेरक प्रभाव था, जो क्रमशः 254.1 मिलीग्राम/एल और 173.4 मिलीग्राम/एल की उपज के साथ (2एस)-एरियोडिक्टिओल और डायहाइड्रोकेमफेरोल का उत्पादन करते थे। इसलिए, हमने बाद के संश्लेषण अनुकूलन के लिए इन दो एंजाइमों का चयन किया।
प्रमोटर परियोजनाओं का अनुकूलन
एसएमएफ3'एच और सीएसएफ3एच की अभिव्यक्ति को और बेहतर बनाने के लिए, हमने प्रमोटर इंजीनियरिंग की शुरुआत की और इन प्रमुख एंजाइमों की अभिव्यक्ति के स्तर को अनुकूलित किया। विभिन्न शक्तियों के प्रमोटरों की स्क्रीनिंग करके, यह पाया गया कि जब पीजीएएल1 और पीजीएएल10 प्रमोटरों के नियंत्रण में एसएमएफ3'एच और एसएमसीपीआर व्यक्त किए गए थे, तो (2एस)-एरियोडिक्ट्योल का अनुमापांक उच्चतम था, जो 382.1 मिलीग्राम/एल तक पहुंच गया था। इसी तरह, हमने CsF3H की अभिव्यक्ति को विनियमित करके और PTDH1, PGAL7 और PSSA1 जैसी विभिन्न शक्तियों के प्रमोटरों का उपयोग करके डायहाइड्रोकेम्पफेरोल के उत्पादन में उल्लेखनीय वृद्धि की है। यह अनुकूलन दर्शाता है कि प्रमुख एंजाइमों की अभिव्यक्ति के स्तर को बढ़ाकर, लक्ष्य मेटाबोलाइट्स की संश्लेषण दक्षता में प्रभावी ढंग से सुधार किया जा सकता है।
मल्टी-कॉपी एकीकरण आउटपुट में सुधार करता है
डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन को और बेहतर बनाने के लिए, हमने जीन मल्टी-कॉपी एकीकरण तकनीक को अपनाया। डायहाइड्रोक्वेरसेटिन संश्लेषण मार्ग की जीन कॉपी को सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया के Ty2 मल्टी-कॉपी साइट में एकीकृत करके, हमने सफलतापूर्वक एक उच्च-उत्पादक स्ट्रेन FQ26ty प्राप्त किया, जिसका डायहाइड्रोक्वेरसेटिन टिटर 71.4 mg/L तक पहुंच गया। मात्रात्मक जीन विश्लेषण से पता चला कि एसएमएफ3एच, एसएमएफ3'एच और एसएमसीपीआर जीन की प्रतिलिपि संख्या 2.87 से 3.44 तक थी, जो दर्शाता है कि जीन मल्टी-कॉपी एकीकरण ने डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन में काफी वृद्धि की है। इसके अलावा, संश्लेषण मार्ग जीन की अधिक प्रतियों को एकीकृत करके, हमने स्ट्रेन FQE-D श्रृंखला का निर्माण किया और डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन को सफलतापूर्वक 74.5 mg/L तक बढ़ा दिया। यह परिणाम साबित करता है कि प्रमुख सिंथेटिक पाथवे जीन की प्रतिलिपि संख्या बढ़ाना लक्ष्य उत्पादों की उपज बढ़ाने के लिए एक प्रभावी रणनीति है।
मेटाबोलिक रिप्रोग्रामिंग और कार्बन मेटाबोलिज्म अनुकूलन
प्रमुख एंजाइमों और जीन एकीकरण को अनुकूलित करने के अलावा, हमने डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के उत्पादन को और बढ़ाने के लिए सैक्रोमाइसेस सेरेविसिया के कार्बन चयापचय प्रणाली को चयापचय रूप से पुन: प्रोग्राम किया। सबसे पहले, हमने PAL पाथवे-संबंधित जीन पेश किए, जिनमें AtPAL2, AtC4H, AtATR2 और ScCYB5 शामिल हैं, और परिणामी स्ट्रेन FQ27 ने 87.8 mg/L का डायहाइड्रोक्वेरसेटिन उत्पादन हासिल किया। इसके बाद, हमने शिकिमेट पाथवे के प्रमुख जीन ARO1/2/3 और ई. कोली से प्राप्त EcAROL जीन को ओवरएक्सप्रेस करके उपज को 103.9 mg/L तक बढ़ा दिया। इसके अलावा, हमने केंद्रीय कार्बन चयापचय को एरिथ्रोस -4-फॉस्फेट के संश्लेषण के साथ मजबूती से जोड़ने के लिए एक विषम फॉस्फोकेटोलेज़ मार्ग भी पेश किया, और फिर 107.5 मिलीग्राम/एल के डायहाइड्रोक्वेरसेटिन उत्पादन के साथ स्ट्रेन FQ29 प्राप्त किया।
एनएडीपीएच और अल्फा-कीटोग्लूटारेट आपूर्ति का अनुकूलन
F3'H को उत्प्रेरक प्रक्रिया के दौरान NADPH का उपभोग करने की आवश्यकता होती है, जबकि F3H को सह-सब्सट्रेट के रूप में -कीटोग्लूटारेट की आवश्यकता होती है। इसलिए, इन दो प्रमुख पदार्थों की आपूर्ति बढ़ाने के लिए, हमने NADPH की आपूर्ति बढ़ाने के लिए TYR1 और ZWF1 जैसे जीनों को अतिरंजित किया। प्रयोगों से पता चलता है कि TYR1 और उत्परिवर्ती BDH1* की सह-अभिव्यक्ति से डायहाइड्रोक्वेरसेटिन का उत्पादन 20.2% बढ़ जाता है, जो 175.8 mg/L तक पहुँच जाता है। इसके अलावा, ARO8 की अधिक अभिव्यक्ति ने -कीटोग्लूटारेट के उत्पादन को और बढ़ावा दिया, जिसके परिणामस्वरूप डायहाइड्रोक्वेरसेटिन का उत्पादन 206 mg/L तक पहुंच गया। अंत में, IDH1 को ओवरएक्सप्रेस करके, हमने 235.1 mg/L की उपज के साथ एक उच्च उपज वाला स्ट्रेन FQ38 प्राप्त किया।
औद्योगीकृत उत्पादन की खोज
प्रयोगशाला-पैमाने पर अनुकूलन के आधार पर, हमने 5 एल बायोरिएक्टर में फेड-बैच किण्वन प्रयोगों का संचालन किया। किण्वन प्रक्रिया के दौरान 5 ग्राम/लीटर CaCO3 जोड़कर, हमने 114 घंटों के भीतर डाइहाइड्रोक्वेरसेटिन के अनुमापांक को सफलतापूर्वक 873.1 मिलीग्राम/लीटर तक बढ़ा दिया, जिससे एक नया उत्पादन रिकॉर्ड स्थापित हुआ।
संक्षेप में, हमने व्यवस्थित चयापचय इंजीनियरिंग और किण्वन प्रक्रिया अनुकूलन के माध्यम से डायहाइड्रोक्वेरसेटिन की माइक्रोबियल संश्लेषण दक्षता में काफी सुधार किया है। यह शोध न केवल डायहाइड्रोक्वेरसेटिन के औद्योगिक उत्पादन के लिए एक तकनीकी आधार प्रदान करता है, बल्कि अन्य पौधों के माध्यमिक चयापचयों के माइक्रोबियल संश्लेषण के लिए एक संदर्भ भी प्रदान करता है।
विविध अनुप्रयोग
आहारीय पूरक
कार्यात्मक खाद्य पदार्थों
प्रसाधन सामग्री
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